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主要材料塑料樣品共有四種塑料樣品,分別為0號對照樣品)非抗菌塑料(未任何添加抗菌劑);1號樣品)抗菌塑料(添加較低濃度的抗菌劑);2號樣品)抗菌塑料(添加稍高濃度的抗菌劑);3號樣品)抗菌塑料(添加較高濃度的抗菌劑);1、2和3號樣品的抗菌劑含量在允許的范圍內(nèi)依次升高。把這四種樣品分別切成(402)mm@(402)mm的尺寸方塊兒待用。所有的樣品在實驗前先用無菌水沖洗,再用75%酒精擦拭消毒,再平鋪到消毒過的無菌玻璃板上,用紫外線照射20min后收在標記好的無菌培養(yǎng)皿中。
檢測過程培養(yǎng)基的配制配制牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基,配方如下表:成分牛肉蛋白胨NaCl水瓊脂pH含量6配制液體培養(yǎng)基(不含瓊脂)500ml,并分裝在20個錐形瓶中。配制一定量的固體培養(yǎng)基,制成斜面留用。所有的培養(yǎng)基配制后要嚴格滅菌。
菌種的活化將斜面保藏菌種分別接種到細菌斜面固體培養(yǎng)基上,371e培養(yǎng)24h,然后取活化的菌種接種到液體培養(yǎng)基中,371e,170rpm搖菌過夜留待接種到塑料膜上。接種與培養(yǎng)無菌的條件下,取搖好的菌液015ml于20ml的上述配好的液體培養(yǎng)基中,利用顯微鏡觀察細菌的數(shù)目,將濃度調(diào)至(5101010)@105cfu/ml,以此作為檢測用菌液。
將無菌的待測薄膜放入培養(yǎng)皿中無菌的(452)mm@(452)mm、厚度為6mm的玻璃上,其中放置玻璃的目的是為了墊高塑料薄膜,皿底加入019%的生理鹽水10ml,提供細菌培養(yǎng)時的充足濕度,如果皿底不放生理鹽水作為維持濕度的必要條件有可能在培養(yǎng)結(jié)束時薄膜內(nèi)的接種菌液已經(jīng)完全干枯了。同時皿底的生理鹽水可以作為培養(yǎng)結(jié)束時的洗脫液的一部分。
放好薄膜和玻璃塊后,取50Ll的接種培養(yǎng)液分別涂于0、1、2、3號塑料薄膜上,然后再將相對應(yīng)樣品的0、1、2、3號塑料薄膜蓋上(即兩層薄膜是同一個樣品)。輕壓并趕走氣泡,使得兩層塑料之間的培養(yǎng)基厚度薄而均勻,操作時盡可能使菌液的展開面積相同。上述操作完成后,將培養(yǎng)皿放入371e溫箱中培養(yǎng)24h.
這三個抗菌塑料的抗細菌率已經(jīng)檢定出來,它們的抗霉菌和抗細菌、霉菌混合能力需要其它的方法加以檢測。從世界范圍內(nèi)來看,抗菌塑料的趨勢正在崛起,它是一種新型的科技材料,需求與產(chǎn)量不斷增加,很多性能等待我們進一步的開發(fā)利用。同時應(yīng)該加快抗菌塑料作為食品包裝材料的研究工作,以明確抗菌塑料的毒性大小,以及抗菌塑料接觸人類食品是對人類健康是有利的還是有害的這個問題。